沧州师范学院学报 第36卷第2期 2020年6月

 

75%苯噻酰草胺·苄嘧磺隆可湿性粉剂高效液相色谱分析

范小振¹，祁方圆¹，张淑华²

1. 沧州师范学院 化学与化工学院；2. 沧州市供排水集团有限公司

摘要：采用高效液相色谱法对75%苯噻酰草胺·苄嘧磺隆可湿性粉剂中苯噻酰草胺和苄嘧磺隆有效成分含量进行测定.该方法选用Synergi Polar-RP 80Å(250mm×4.6mm,4μm)色谱柱，以甲醇∶水=85∶15(V/V)为流动相，在紫外吸收波长237nm下进行测定.结果显示：苄嘧磺隆和苯噻酰草胺的保留时间分别为6.6min和7.6min，线性相关系数分别为0.999 0和0.999 5，平均回收率分别为102.57%和110.49%，变异系数分别为1.26%和0.44%，该方法操作简单，快速准确，可广泛应用.

关键词：苯噻酰草胺; 苄嘧磺隆; 可湿性粉剂; 高效液相色谱

作者简介：范小振(1966-)，男，河北肃宁人，沧州师范学院化学与化工学院教授，理学硕士，研究方向：环境监测和农药检测．

Analysis of 75% Mefenacet and Bensulfuron-methyl Wettable Powder by High Performance Liquid Chromatography

FAN Xiao-zhen¹; QI Fang-yuan¹; ZHANG Shu-hua²

1.College of Chemistry and Chemical Engineering, Cangzhou Normal University; 2.Cangzhou Water Supply and Drainage Group Company Limited

Abstract: A method to determine the active ingredients of mefenacet and bensulfuron-methyl in 75% mefenacet and bensulfuron-methyl wettable powder by high performance liquid chromatography was established. This method was carried out by adopting the Synergi Polar-RP 80Å(250 mm×4.6 mm, 4μm)column, with methanol-water(volume ratio 85∶15)as the mobile phase, 237 nm ultraviolet detection wavelength. The results show that:the retention times of bensulfuron-methyl and mefenacet were 6.6 min and 7.6 min respectively, and the linear correlation coefficients for mefenacet and bensulfuron-methyl were 0.999 0 and 0.999 5 respectively, the average recovery rates were 102.57% and 110.49%, the variation coefficients were 1.26% and 0.44% respectively. This method is simple, fast and accurate,and can be widely used.

Keyword: mefenacet; bensulfuron-methyl; wettable powder; high performance liquid chromatography

苯噻酰草胺又名环草胺，是一种选择性内吸传导型除草剂，具有抑制细胞生成和分裂的作用，主要用于水田防除一年生禾本科杂草和牛毛毡，具有高效、低毒的优点，在国内未来的农药市场上有着广阔的发展前景^[1]．苯噻酰草胺的检测方法主要有气相色谱法^[2]、高效液相色谱法^[3]和QuEChERS-气相色谱-质谱法^[4]等．

苄嘧磺隆又名农得时，磺酰脲类除草剂，主要用于防除稻田阔叶杂草和莎草．苄嘧磺隆是水稻除草单剂中一个很重要的品种，特点显著，优点多多，包括适应性广、用量极低、杀草谱宽、施药期长、施法灵活、安全性高、可混性强等，是目前我国使用最为普遍的稻田除草剂之一^[5]．苄嘧磺隆的检测方法主要有高效液相色谱法^[6]、毛细管电泳法^[7]和高效薄层析法^[8]等．

苯噻酰草胺和苄嘧磺隆复配可以扩大杀草谱、减少用药量、提高药效、降低残留量^[9]，对水稻拋秧田^[10,11]、移栽田的杂草^[12,13]有很好的防除效果．对于二者复配制剂中有效成分的测定主要采用高效液相色谱法．已经建立了几种高效液相色谱法测定42.5%^[14]和53%^[15]苯·苄复配制剂及0.42%^[16]药肥混剂中苄嘧磺隆和苯噻酰草胺的方法，虽然这些方法测定准确度、精密度和线性范围都很好，但要么保留时间长，要么流动相配制相对复杂．目前75%苯噻酰草胺·苄嘧磺隆复配制剂有效成分测定方法尚无研究报道．本实验采用高效液相色谱法对75%苯噻酰草胺·苄嘧磺隆可湿性粉剂中苯噻酰草胺和苄嘧磺隆的含量进行测定，以期达到保留时间适中、流动相简单、准确和精密度较好的效果．

1 实验部分

1.1 仪器

大连伊力特P3100高效液相色谱仪；日本岛津UV-2600紫外可见分光光度计；Synergi 4μm Polar-RP80（250mm×4.6mm）不锈钢色谱柱；超声波清洗器；低速台式大容量离心机；溶剂过滤器．

1.2 试剂

甲醇（色谱纯）；超纯水（自制）；苯噻酰草胺和苄嘧磺隆标样（已知纯度≥98%);75%苯噻酰草胺·苄嘧磺隆可湿性粉剂（市售）．

1.3 色谱条件

色谱柱：Synergi Polar-RP 80（250mm×4.6mm,4μm）；流动相：甲醇-水（体积比为85∶15）；流量大小：1.0mL·min^-1；进样体积：20μL；检测波长：237nm；温度：室温；保留时间：苄嘧磺隆6.6min，苯噻酰草胺7.6min．混合标样色谱及样品色谱分别如图1、图2所示．

 

1-苄嘧磺隆  2-苯噻酰草胺

图1 混合标样色谱图 

1-苄嘧磺隆  2-苯噻酰草胺

图2 样品色谱图

1.4 分析步骤

1.4.1 混合标准溶液的配制

分别称取苯噻酰草胺标样0.300 0g（准确至0.000 2g）和苄嘧磺隆标样0.028 0g于小烧杯中，用少量甲醇溶解，置于超声波振荡器中振荡2min，冷却到室温后移入25mL容量瓶中，并用甲醇定容至刻度，摇匀，即配成苯噻酰草胺和苄嘧磺隆混合标准储备液．

1.4.2 试样溶液的配制

准确称取75%苯噻酰草胺·苄嘧磺隆样品0.329 1g于小烧杯中，用少量甲醇溶解，置于超声波振荡器中振荡2min，冷却至室温后移入25mL容量瓶中，并用甲醇定容至刻度，摇匀．离心分离10min，取上层清液，即得到试样溶液，备用．

1.4.3 测定

在上述色谱条件下，待仪器基线稳定，连续注入数针样品溶液，计算各针相对响应值的重复性，待各针相对响应值的变化小于1.5%时，按标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行分析．

1.5 计算

将平行测定6次的试样溶液中苯噻酰草胺和苄嘧磺隆的峰面积分别进行平均，代入标准曲线得到各自浓度，按下式计算试样中苯噻酰草胺和苄嘧磺隆的质量分数：

式中：X为试样中有效成分的百分含量；C为有效成分代入标准曲线得出的浓度，单位为μg·mL^-1;P为标准试样的百分含量；M为称取的试样质量，单位为g.

2 结果与讨论 

1-苯噻酰草胺  2-苄嘧磺隆

图3 苯噻酰草胺、苄嘧磺隆紫外谱图

2.1 测定条件的选择

2.1.1 检测波长的选择

取苯噻酰草胺和苄嘧磺隆标准品，用甲醇溶解配制成一定浓度的溶液，利用紫外可见分光光度计在200～350nm波长范围内进行扫描，得到苯噻酰草胺和苄嘧磺隆紫外谱图，见图3．对二者紫外谱图进行分析，可发现在波长为237nm时，苯噻酰草胺和苄嘧磺隆均有较理想的吸收，故最佳检测波长确定为237nm.

2.1.2 流动相选择

以Synergi 4μm Polar-RP 80（250mm×4.6mm）不锈钢柱为色谱柱，分别采用不同比例的甲醇-水为流动相，在甲醇∶水=85∶15(V/V）时，色谱峰峰形对称，保留时间适宜，分离度较好．因此本实验采用85∶15的甲醇-水（V/V）为流动相，流速为1.0mL·min^-1.

2.2 线性相关性测定

在上述确定的色谱条件下，分别移取40,60,80,100,120μL混合标准储备液于10mL容量瓶中，并用甲醇定容至刻度，摇匀，配制成一系列标准溶液．定量进样20μL，每个浓度平行进样三次，取平均值．以苯噻酰草胺和苄嘧磺隆标准系列浓度ρ（μg·mL^-1）为横坐标，以各自的峰面积为纵坐标，分别绘制标准曲线．实验测得苯噻酰草胺的线性回归方程为A=51.541ρ+48.273，相关系数为0.999 5；苄嘧磺隆的线性方程为A=54.242ρ+11.675，相关系数为0.999 0．结果表明，苯噻酰草胺和苄嘧磺隆的质量浓度与峰面积之间线性关系良好．

2.3 方法精密度测定

从同一制剂中准确称取6份试样，按1.3色谱条件进行分析，计算苯噻酰草胺和苄嘧磺隆质量浓度、标准偏差和变异系数，结果见表1．苯噻酰草胺和苄嘧磺隆的标准偏差分别为0.40和0.11，变异系数分别为0.44%和1.26%．实验表明该分析方法精密度良好，可满足日常定量分析的要求．

表1 苯噻酰草胺、苄嘧磺隆分析方法精密度实验结果 

2.4 方法准确度测定

为了考察分析方法的准确度，对试样进行加标回收实验．在已知含量的75%苯噻酰草胺·苄嘧磺隆复配制剂试样中分别加入一定量的苯噻酰草胺和苄嘧磺隆标样，在1.3色谱条件下测定其含量，计算加标回收率，结果见表2．结果显示，苯噻酰草胺和苄嘧磺隆的平均回收率分别为110.49%和102.57%．方法准确度较高，可满足定量分析要求．

表2 苯噻酰草胺、苄嘧磺隆准确度实验结果

3 结论

本实验采用高效液相色谱法建立了75%苯噻酰草胺·苄嘧磺隆可湿性粉剂中苯噻酰草胺和苄嘧磺隆含量的检测方法．使用Synergi 4μm Polar-RP 80（250mm×4.6mm）不锈钢柱和紫外检测器，以甲醇-水（体积比85∶15）为流动相，同一色谱柱定量分析检测样品中苯噻酰草胺和苄嘧磺隆含量．实验结果表明，该方法操作简单，线性关系良好，精密度和准确度较高，分析时间短．在确定的色谱操作条件下，8min内即可完成全分析，且不需要对待测样品进行前处理．该方法可作为测定75%苯噻酰草胺·苄嘧磺隆可湿性粉剂的一种选择．

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